Ruang Terbuka Hijau (RTH) di perkotaan menjadi area yang sangat penting bagi masyarakat perkotaan karena sebagai tempat rekreasi, pendidikan, dan kesehatan. Jalan Gajah Mada adalah salah satu jalan di kota samarinda yang menjadi jalan utama serta memiliki area ruang terbuka hijau (RTH). Penelitan ini bertujuan untuk menganalisis karakteristik iklim mikro, indeks kenyamanan serta mengetahui persepsi pengunjung terhadap kenyamanan dan fasilitas yang ada di RTH. Pengukuran dilakukan selama 15 hari dan diukur tiga kali sehari yaitu pada pagi hari (pukul 07:00-08:00 WITA), siang hari (pukul 12:00-13:00 WITA), dan sore hari (pukul 16:00-17:00 WITA) dengan menggunakan alat Environment meter. Pengumpulan data mengenai persepsi pengunjung dilakukan dengan menyebarkan kuesioner kepada 30 responden dan dengan penilaian menggunakan skala Likert. Berdasarkan hasil penelitian ini menunjukan bahwa nilai intensitas cahaya matahari pada Titik 1 sebesar 4630 lux, Titik 2 sebesar 4692 lux, dan Titik 3 sebesar 4600 lux. Suhu udara harian pada Titik 1, 2, dan 3 masing-masing sebesar 28,7°C, 29,0°C, dan 28,5°C. Kelembapan udara harian pada Titik 1 sebesar 75,1%, pada Titik 2 sebesar 74,6%, dan pada Titik 3 sebesar 75,7%. Indeks kenyamanan pada tiga titik pengukuran berbeda memiliki nilai THI 27,3 pada titik 1 dengan kategori nyaman. 27,5 pada titik 2 dengan kategori nyaman. dan 27,1 pada titik 3 dengan kategori nyaman. Berdasarkan persepsi pengunjung mengenai kenyamanan dan fasilitas yang tersedia di RTH Jalan Gajah Mada dari berbagai indikator yaitu iklim mikro, fasilitas, keindahan, aksebilitas, keamanan, kebersihan, dan kebisingan bahwa RTH di Jalan Gajah Mada memiliki nilai ratarata dengan kategori baik dan nyaman untuk pengunjung. Informasi mengenai Iklim Mikro dan Persepesi Pengunjung di Jalan Gajah Mada Samarinda dapat menjadi masukan untuk terus meningkatkan Ruang Terbuka Hijau di Kota Samarinda.