Pirazolina merupakan senyawa golongan alkaloid yang memiliki banyak aktivitas biologis seperti antimalaria, anti-inflamasi, antibakteri, antikanker, dan lain-lain. Pirazolina memiliki potensi sebagai kandidat untuk obat baru seperti antibiotic namun pirazolina jarang ditemukan di alam. Penelitian ini bertujuan untuk mensintesis turunan pirazolina baru dengan uji pendahuluan melalui aktivitas antibakteri untuk mengetahui potensinya. Turunan pirazolina dapat disintesis dari 2-hidroksi-5-kloro-4-metoksikalkon dan tiosemikarbazida sebagai bahan dasar menggunakan metode refluks pada 78 ℃ selama 9 jam. Struktur senyawa hasil sintesis dikarakterisasi dengan spektrofotometer FTIR dan 1H-NMR. Pengujian antibakteri menggunakan metode difusi sumuran. Senyawa ini memiliki aktivitas antibakteri kategori sedang terhadap terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus menggunakan antibiotik komersial klindamisin. Senyawa N-karbotiomida-3-(-2-hidroksi-5-klorofenil-5-(4-metoksifenil) pirazolina hasil sintesis berupa serbuk kuning kecoklatan dengan rendemen 8,75%.