Penentuan nilai LC50 – 96 jam dilakukan dengan analisis probabilitas unit(Probit), perubahan histopatologik insang secara deskriptif, pola renang dan frekuensi pernafasan secara tabulasi dan deskriptif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai LC50 – 96 jam larutan ekstrak daun pepaya sebesar 616,59 mg/L yang berarti konsentrasi tersebut dapat menyebabkan kematian 50% hewan uji dalam waktu 96 jam dan termasuk dalam kriteria toksisitas ringan. Analisis histopathologik insang menunjukkan perubahan berupa odema, hiperplasia, fusi. Kesimpulannya bahwa larutan ekstrak daun pepaya bersifat toksik pada konsentrasi 616,59 mg/L, menyebabkan perubahan histopatologik insang dan dapat mempengaruhi pola renang serta frekuensi pernafasan ikan yang terpapar selama 96 jam