Kebiasaan mencuci tangan menjadi kunci dalam pencegahan datangnya penyakit. Paper soap merupakan salah satu bentuk sabun unik berupa lembaran tipis yang menyerupai seperti kertas, dengan penggunaannya yang nyaman, higienis, dan praktis. Eleutherine palmifolia (L.) Merr. merupakan tanaman yang memiliki khasiat dalam bidang kesehatan yaitu sebagai antibakteri. Tujuan dari penelitian ini adalah menentukan konsentrasi terbaik dalam pembuatan formulasi paper soap sebagai antiseptik dari ekstrak etanol umbi bawang dayak (Eleutherine palmifolia (L,) Merr.) menggunakan basis gliserin. Dibuat konsentrasi ekstrak sebesar 2,5%, 5%, 7,5%, 10%, dan 12,5%. Hasil uji antibakteri ekstrak terbaik yang didapatkan yaitu konsentrasi 12,5% dengan zona hambat bakteri Escherichia coli 10,91 mm dan bakteri Staphylococcus aureus 12,47 mm. Sediaan paper soap ekstrak etanol umbi bawang dayak (Eleutherine palmifolia (L.) Merr.) dibuat dalam 3 replikasi formula dengan konsentrasi ekstrak 12,5% pada setiap FR1, FR2, dan FR3. Hasil evaluasi warna sediaan coklat muda, berbau mawar, berbentuk kertas, pH 5,5-6,5, kadar air 0,5-0,9%, stabilitas ketinggian busa 80-91%, dan keseragaman bobot 0,109-0,119 gram. Uji efektivitas antibakteri sediaan terhadap bakteri Escherichia coli menunjukkan zona hambat 7,53-7,72 mm dan bakteri Staphylococcus aureus menunjukkan zona hambat 11,14-11,85 mm. Kesimpulan dalam penelitian ini adalah formulasi sediaan paper soap sebagai antiseptik mampu menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus, serta telah memenuhi standar karakteristik fisik.