Human Immunodeficiency Virus (HIV) adalah virus yang menyerang sel darah putih (limfosit) tubuh dan melemahkan sistem kekebalan tubuh. Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS) adalah sekumpulan gejala akibat rusaknya sistem kekalan tubuh manusia yang disebabkan oleh HIV. Mahasiswa keperawatan adalah calon tenaga kesehatan di masa depan yang memiliki peran penting untuk memberikan pelayanan kesehatan yang profesional oleh sebab itu pentingnya pengetahuan bagi mahasiswa, apabila mahasiswa keperawatan tidak memiliki pengetahuan yang cukup akan berdampak pada ketakutan. Ketakutan tersebut berupa mahasiswa tidak ingin merawat pasien yang terinfeksi HIV/AIDS karena takut tertular melalui cairan tubuh dan percikan darah. Tujuan penelitian ini untuk mengidentifikasi gambaran pengetahuan HIV/AIDS dan ketakutan irasional pada mahasiswa keperawatan di kota Samarinda terkait orang dengan HIV/AIDS. : Metode yang digunakan adalah metode Survei dengan pendekatan kuantitatif. Menggunakan teknik consecutive sampling sebanyak 157 mahasiswa keperawatan di Kota Samarinda. Alat ukur yang digunakan dalam mengukur pengetahuan yaitu HIV-KQ-18 dan untuk ketakutan irasional yaitu ketakutan irasional. Hasil penelitian mengenai tingkat pengetahuan HIV/AIDS didapatkan responden yang memiliki pengetahuan kurang sebanyak 127 responden (80.9%). Hasil penelitian mengenai ketakutan irasional didapatkan responden yang memiliki ketakutan tinggi sebanyak 90 responden (57.3%). Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan oleh peneliti menunjukan bahwa sebagian besar mahasiswa keperawatan di Kota Samarinda memiliki pengetahuan yang kurang dan ketakutan irasional yang tinggi terhadap penyakit HIV/AIDS.