Singkil (Premna cordifolia Roxb.) merupakan tanaman herbal khas Kutai Kartanegara yang dimanfaatkan sebagai obat tradisional, seperti obat diare dan
infeksi kulit. Pada penelitian ini dilakukan uji fitokimia dan uji aktivitas antibakteri ekstrak metanol, fraksi n-heksana, fraksi etil asetat, dan fraksi metanol air terhadap bakteri Propionibacterium acnes KCCM 41747 dan Escherichia coli ATCC 25922. Daun singkil diekstraksi dengan metanol dan dipartisi
menggunakan pelarut n-heksana dan etil asetat. Ekstrak dan fraksi daun singkil dilakukan uji fitokimia dan aktivitas antibakteri terhadap Propionibacterium
acnes KCCM 41747 dan Escherichia coli ATCC 25922. Hasil uji fitokimia menunjukkan ekstrak metanol singkil mengandung alkaloid, flavonoid, steroid,
dan saponin. Fraksi n-heksana mengandung steroid. Fraksi etil asetat mengandung alkaloid, flavonoid, dan fenolik. Fraksi metanol air mengandung alkaloid, flavonoid dan fenolik. Hasil skrining aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa fraksi etil asetat memiliki aktivitas antibakteri tertinggi diantara keempat ekstrak. Nilai konsentrasi hambat minimum fraksi etil asetat terhadap Propionibacterium acnes KCCM 41747 sebesar 0,625% dan Escherichia coli ATCC 25922 sebesar 2,5%.