Teknologi informasi untuk saat ini sudah menjadi bagian yang tidak bisa dipisahkan dalam kehidupan manusia. Teknologi informasi juga dapat dimanfaatkan dalam proses belajar mengajar dibidang pendidikan. Mulawarman Online Learning Sistem (MOLS) adalah sistem e-leraning Universitas Mulawarman yang bertujuan untuk mempermudah proses belajar mengajar secara jarak jauh. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui tingkat usability dari sistem MOLS berdasarkan kategori mahasiswa dan dosen, serta jenis kelamin dan angkatan mahasiswa dengan menggunakan metode System Usability Scale (SUS). Sampel yang digunakan sebanyak 395 responden yang terdiri dari dosen dan mahasiswa. Hasil menunjukan bahwa kategori dosen memperoleh skor SUS sebesar 62,9 dengan grade scale C-, adjective rating OK dan acceptability ranges yaitu marginal high. Mahasiswa memperoleh skor 71,3 dengan grade scale C+, adjective rating OK dan acceptability ranges yaitu acceptable. Kategori jenis kelamin laki-laki memperoleh skor 71,2 dengan grade scale C+, adjective rating OK dan acceptability ranges yaitu acceptable. Jenis kelamin perempuan memperoleh skor 69,5 dengan grade scale C, adjective rating OK dan acceptability ranges yaitu marginal high. Kategori angkatan 2018 memeroleh skor 68,9 dengan grade scale C, adjective rating OK dan acceptability ranges yaitu marginal high. Angkatan 2019 memperoleh skor 73,1 dengan grade scale B-, adjective rating yaitu Good dan acceptability ranges yaitu acceptable. Angkatan 2020 memperoleh skor 70,8 dengan grade scale C, adjective rating OK dan acceptability ranges marginal high. Angkatan 2021 memperoleh skor 72,3 dengan grade scale C+, adjective rating OK dan acceptability ranges yaitu acceptable. Lalu dilakukan analisis SUS gabungan dari keseluruhan responden yang memperoleh skor 70,2 dengan grade scale C, adjective rating OK dan acceptability ranges yaitu marginal high yang berarti bahwa sistem MOLS sudah menunjukkan kinerja yang cukup baik dan sudah cukup memenuhi standar usability, namun masih harus dilakukan dan pengembangan sehingga dapat lebih efisien, efektif, dan memuaskan penggunanya.