Sirih hitam (Piper betle L. Var Nigra) merupakan salah satu tumbuhan asli Indonesia yang dapat berfungsi sebagai obat tradisional. Tumbuhan ini merupakan salah satu spesies dari tanaman sirih yang banyak terdapat di Indonesia. Spesies lain dari tanaman ini, yaitu sirih merah, dan sirih hijau sering digunakan masyarakat Indonesia untuk berbagai pengobatan tradisional yang potensinya perlu digali secara sungguhsungguh Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui teknik isolasi senyawa metabolit sekunder pada daun Sirih hitam. Pada penelitian ini dilakukan ekstraksi dengan pelarut metanol yang kemudian dipartisi etil asetat. Metode pemisahan senyawa metabolit sekunder menggunakan Kromatografi cair vakum (KCV) dan Kromatografi Kolom (KK) dengan eluen gradien kemudian identifikasi tiap tahap pemisahan menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT) lalu diamati dibawah sinar UV 245nm dan 366nm setelah itu disemprot menggunakan pereaksi Dragendorff dan FeCl3 lalu pemurnian dan uji kemurniaan dengan metode Kromatografi Lapis Tipis preparatif (KLTP) dan KLT 2 Dimensi. Hasil penelitian yang didapat satu isolat yang berhasil diisolasi dari Fraksi Q1 teridentifikasi golongan alkaloid berdasarkan hasil Identifikasi KLT dan KLT 2 Dimensi dengan penyemprotan pereaksi Dragendroff. Kata Kunci : Metabolit Sekunder, Isolasi, Sirih Hitam