Orang tua berperan dalam kebiasaan perawatan gigi anak seperti menyikat gigi, dan diketahui bahwa sebagian besar anak menyikat gigi di waktu yang tidak tepat. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui bagaimana hubungan antara pengetahuan orang tua tentang kesehatan gigi dan mulut dengan kebiasaan menyikat gigi pada anak. Penelitian ini bersifat observasional analitik dengan desain studi cross sectional. Penelitian ini dilakukan pada 403 responden di Samarinda. Hasil penelitian menunjukkan rata-rata skor pengetahuan orang tua sebesar 10,71 dan sebagian besar anak sudah menyikat giginya dua kali sehari setiap harinya akan tetapi masih sedikit yang melakukannya di waktu yang tepat yaitu hanya sebanyak 51 (12,7%). Dan berdasarkan hasil uji somers’d didapati nilai p = 0,008; 0,011; 0,067; 0,007 dan didapati nilai r = 0,098; 0,0112; 0,054; 0,132 dengan arah positif. Terdapat hubungan yang sangat lemah antara tingkat pengetahuan kesehatan gigi dan mulut orang tua dengan kebiasaan menyikat gigi anak yang meliputi rutinitas, frekuensi dan teknik menyikat gigi, akan tetapi tidak terdapat hubungan dengan waktu menyikat gigi anak.