Pule (Alstonia scholaris (L.) R.Br.) merupakan salah satu tanaman yang secara empiris sering digunakan dalam pengobatan. Kulit batang pule memiliki kandungan flavonoid yang umumnya dapat digunakan sebagai antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder serta aktivitas antioksidan dari ekstrak metanol, etil asetat dan n-heksana kulit batang pule dengan menentukan nilai IC50 ekstrak. Uji metabolit sekunder dilakukan dengan mereaksikan ekstrak dengan reagen uji fenolik, steroid, triterpenoid, saponin, flavonoid serta alkaloid. Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan metode DPPH (2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazil). Aktivitas antioksidan diukur dari kemampuan ekstrak kulit batang pule meredam DPPH yang terukur dengan alat spektrofotometer UV-Vis sehingga diperoleh data absorbansi kemudian diolah dengan metode regresi linear. Hasil menunjukkan ekstrak mengandung senyawa fenolik dan flavonoid. Sedangkan uji DPPH menunjukkan ekstrak metanol memiliki aktivitas antioksidan yang lemah dengan nilai IC50 sebesar 472,72 ppm, ekstrak etil asetat memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat dengan nilai IC50 sebesar 42,44 ppm, sedangkan ekstrak n-heksana tidak aktif sebagai antioksidan dengan nilai IC50 sebesar 1815,68 ppm.