Latar Belakang: Pepaya (Carica papaya L.) merupakan tanaman yang seluruh bagiannya dapat dimanfaatkan, yaitu akar, daun, buah, kulit dan getah. Kulit buah pepaya mengandung flavonoid, tanin, saponin, alkaloid, steroid dan papain yang memiliki aktivitas antibakteri terutama pada kulit buah pepaya muda. S.mutans merupakan bakteri utama penyebab karies gigi. Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak kulit buah pepaya (Carica papaya L.) dalam menghambat pertumbuhan bakteri S.mutans. Metode: Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratoris dengan desain penelitian post test only control design. Penelitian ini menggunakan metode disc diffusion. Subjek penelitian terbagi menjadi kelompok perlakuan dan kelompok kontrol. Kelompok perlakuan berupa bakteri S.mutans yang diberi ekstrak kulit buah pepaya (Carica papaya L.) pada kertas cakram dengan konsentrasi 1%, 10%, 20%, 40%, 60% dan 80%, sedangkan pada kelompok kontrol positif bakteri S.mutans diberi larutan chlorhexidine gluconate 0,2% dan aquades steril pada kelompok kontrol negatif. Analisis data menggunakan uji Shapiro-Wilk dan uji one way ANOVA. Hasil: Ekstrak kulit buah pepaya (Carica papaya L.) pada konsentrasi 1%, 10%, 20%, 40%, 60% dan 80%, memiliki aktivitas antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri S.mutans. Zona hambat muncul sejak konsentrasi 1% dan terus meningkat hingga konsentrasi 40%, penurunan diameter zona hambat mulai terjadi pada konsentrasi 60%. Kesimpulan: Aktivitas antibakteri ekstrak kulit buah pepaya (Carica papaya L.) dengan zona hambat terkecil yaitu pada konsentrasi 1% dan terbesar pada konsentrasi 40%. Kata kunci : Kulit buah pepaya, Antibakteri, S.mutans.