Anggrek hitam, dengan nama latin Coelogyne pundarata Lindl. merupakan salah satu spesies anggrek yang memiliki keunikan tersendiri dengan warna lidah bunga (labellum) berwarna hitam dan memiliki mahkota bunga berwarna hijau.Rendahnya keberhasilan perkecambahan biji anggrek dengan cara perbanyakan generatif konvensional dan adanya gangguan ekologi seperti konversi hutan dan eksploitasi berlebihan menyebabkan jumlah populasi anggrek hitam menjadi berkurang. Kultur jaringan merupakan salah satu metode perbanyakan tanaman yang digunakan untuk menyelamatkan jumlah populasi tanaman anggrek hitam dikarenakan metode ini dapat menghasilkan bibit tanaman dalam waktu yang relatif cepat dengan jumlah yang banyak dan memiliki sifat genetik yang sama dengan induknya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh kombinasi pupuk daun dan bahan pisang ambon, kecambah dan biji jagung untuk pertumbuhan biji anggrek hitam secara kultur jaringan. Penelitian ini dilaksanakan dari bulan Januari sampai Mei 2022 di Laboratorium Kultur Jaringan, Fakultas Pertanian, Universitas Mulawarman. Penelitian ini disusun dalam Rancangan Acak Lengkap (RAL) faktor tunggal yang terdiri dari delapan perlakuan, yaitu kombinasi pupuk daun Growmore dan ekstrak bahan organik berupa ekstrak pisang ambon mentah, ekstrak kecambah kacang hijau dan ekstrak biji jagung manis. Masing-masing perlakuan diulang sebanyak empat kali. Data dianalisis dengan menggunakan analisis ragam dan dilanjutkan dengan uji lanjut Duncan Multiple Range Test (DMRT) taraf 5%. Hasil penelitian menunjukan bahwa kombinasi pupuk daun dan ekstrak bahan organik mampu untuk menginduksi pertumbuhan biji anggrek hitam. Kombinasi pupuk daun dan ekstrak bahan organik berpengaruh sangat nyata terhadap waktu pembentukan protocorm, tetapi berpengaruh tidak nyata terhadap waktu muncul tunas, tinggi eksplan dan pertumbuhan jumlah daun. Kombinasi pupuk daun dan bahan organik terbaik untuk semua variabel terdapat pada perlakuan Growmore 1 g L-1 + ekstrak pisang ambon mentah 100 g L-1 + ekstrak kecambah kacang hijau 100 g L-