Tanaman sirih hitam telah diketauhi memiliki beberapa kandungan metabolit sekunder yaitu flavonoid, tanin, alkaloid, polifenol, dan terpenoid. Setiap tanaman diketahui dapat mengandung beberapa mikroba endofit yang mampu menghasilkan senyawa biologi atau metabolit sekunder yang diduga sebagai akibat koevolusi atau transfer genetik dari tanaman inangnya ke dalam mikroba endofit. Tujuan penelitian ini adalah untuk mendapatkan isolat fungi endofit yang ada pada daun sirih hitam. Metode isolasi yang digunakan adalah metode tanam langsung dimana potongan sampel yang telah disterilisasi permukaannya diletakkan pada medium PDA kemudian dilakukan pemurnian, karakterisasi, dan identifikasi. Hasil penelitian didapatkan 1 isolat fungi endofit yaitu Mycoleptodiscus sp yang memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphyloccocus aureus, Staphyloccocus epidermidis, dan Propionibacterium acnes