Bakteri endofit merupakan bakteri yang hidup di dalam jaringan tumbuhan tanpa menyebabkan penyakit bagi tumbuhan inangnya. Salah satu kontribusinya yaitu sebagai sumber penghasil lipase. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan bakteri endofit dari daun ciplukan (Physalis angulata L.) penghasil lipase dan mengkarakterisasi lipase tersebut untuk dimanfaatkan sebagai aditif deterjen. Tahapan penelitian meliputi skrining bakteri endofit penghasil lipase, penentuan kondisi kerja optimum ekstrak kasar lipase, pengaruh ion logam dan pengaruh deterjen. Aktivitas lipase ditentukan menggunakan metode titrimetri. Hasil skrining diperoleh tiga isolat bakteri endofit berpotensi menghasilkan lipase. Isolat 14 memiliki aktivitas tertinggi sebesar 3,813 U/mL. Kondisi kerja optimum lipase berada pada pH 8, suhu 45ºC dan konsentrasi substrat sebesar 2%. Ion logam Mg2+, Ba2+ dan K+ menurunkan aktivitas lipase dan Ca2+ meningkatkan aktivitas lipase sedangkan Fe3+ menyebabkan lipase terdenaturasi. Ekstrak kasar lipase mengalami penurunan aktivitas lebih dari 50% pada paparan deterjen 1%.