Fermentasi telur ikan biawan merupakan salah satu makanan fermentasi tradisional di Kalimantan Timur yang dalam fermentasinya melibatkan garam. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas dari antibakteri yang dihasilkan oleh isolat bakteri asam laktat (BAL) dari fermentasi telur ikan biawan dalam menghambat pertumbuhan beberapa bakteri patogen pangan. Dari kedua sampel fermentasi telur ikan biawan (Kenohan dan Muara Muntai) diperoleh 6 isolat yang telah dikonfirmasi sebagai BAL. Aktivitas antibakteri isolat diujikan terhadap 4 bakteri patogen pangan (Escherichia coli, Salmonella atcc type 140281, Bacillus cereus type 120819, Staphylococcus aureus). Keenam kultur bakteri mempunyai aktivitas antimikroba yang lemah terhadap keempat bakteri uji, dengan aktivitas terkuat yaitu terhadap B. cereus type 120819, ditunjukkan oleh isolat AA dan BB. Isolat AB menunjukkan aktivitas antimikroba terhadap 3 bakteri patogen, kecuali S. aureus. Supernatan isolat BAL masih menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap Salmonella atcc type 140281 dan B. cereus. Setelah crude protein diendapkan, salah satu isolat yaitu BT masih menunjukkan antivitas penghambatan terhadap B. cereus type 120819. Isolat BAL dari Fermentasi telur ikan biawan menunjukkan potensi penghambatan terhadap patogen pangan.