Lygodiun microphyllum merupakan jenis tanaman paku yang memiliki kandungan senyawa yang ekstraknya banyak berpotensi di bidang farmasi. Pada penelitian ini dilakukan pengujian toksisitas akut oral ini bertujuan untuk menentukan nilai LD50 akibat pemberian ekstrak metanol daun kerokot (Lygodiun microphyllum). Mencit Betina galur DDY sebanyak 30 ekor yang digunakan sebagai hewan coba dan dibagi menjadi 6 kelompok, yang terdiri 5 kelompok uji dosis dan 1 kelompok kontrol negatif. Dosis yang digunkan yaitu 300, 625, 1250, 2500, dan 5000 mg/kg BB. Pemberian dosis tunggal dilakukan secara oral pada hari ke-0 dan dilakukan pengamatan hingga hari ke-14, kemudian dihitung jumlah hewan uji yang mati di setiap kelompok, gejala klinis, indeks organ hati, kadar SGOT dan SGPT, serta jaringan sel organ hati mencit. Hasil penelitian menggunakan nilai LD50 semu yaitu nilai LD50 ekstrak metanol daun kerokot secara peroral lebih besar dari 5000 mg/kgBB dan tidak ditemukan gejala klinis. Parameter tambahan, indeks organ hati tidak berpotensi toksik, kemungkinan terdapat pengaruh pada kadar SGOT dan SGPT serta jaringanorgan sel hati mencit.

Kata kunci: Lygodium microphyllum, toksisitas Akut, LD50