Senyawa flavonoid telah diisolasi dan karakterisasi pada dari daun Macaranga hullettii King ex Hook.f. Telah dilakukan proses pemisahan pada fraksi etil asetat menggunakan kolom kromatografi vakum dan gravitasi dengan metode Step Gradient Polarity (SGP). Isolat yang didapatkan diuji kemurniannya dengan berbagai eluen yaitu aseton, kloroform, diklorometan, etil asetat dan n-heksana dengan nilai Rf berturut-turut sebesar 0,900; 0,875; 0,250; 0,925 dan 0. Isolat yang diperoleh yaitu senyawa MH-1 berupa kristal. Analisis MH-1 dengan spektrofotometer UV menghasilkan 2 pita pada λ 268,46 (pita II) dan 340 nm (pita I). Analisis dengan Spektrofotometri IR menghasilkan gugus –OH, C-O-C, C=O, C-H alifatik, C-H aromatik, C=C aromatik. Berdasarkan hasil uji spektrum UV dan IR maka MH-1 diduga merupakan senyawa flavonoid.
Kata Kunci: Flavonoid, Macaranga hullettii King ex Hook.f, Isolasi.