Latar Belakang. Bawang tiwai (Eleutherine americana Merr.) dari famili Iridaceae digunakan oleh etnis dayak Kaltim sebagai ramuan untuk menurunkan tekanan darah, meningkatkan kesehatan,dan antidiare. Pada tikus pemberian secara oral dapat menurunkan tekanan darah tetapi mekanisme aksi secara langsung di pembuluh darah belum diketahui. Tujuan Penelitian. Membuktikan aktivitas vasodilatasi ekstrak etanol umbi Eleutherine americana Merr. (UEA) secara langsung pada pembuluh darah secara bioassay. Metode. UEA diperoleh dari sentra pertanian di kota Samarinda, Provinsi Kalimantan Timur, Indonesia. Simplisia UEA diekstraksi secara maserasi dengan pelarut etanol. Ekstrak dipekatkan dengan vacuum rotavapor dan dikeringkan lebih lanjut dalam oven. Aktivitas vasodilatasi pada pembuluh darah diuji secara bioassay menggunakan organ terpisah cincin aorta tikus strain Wistar dengan endotel. Ekstrak etanol UEA dilarutkan dalam DMSO-Etanol 10% dan diberikan log konsentrasi secara kumulatif pada organ bath 10 mL, sebagai Kontrol digunakan pelarut ekstrak. Replikasi 5 ekor tikus dan hasil dinyatakan dalam persentase vasodilatasi Mean ± SE, nilai negative menunjukkan aktivitas vasodilatasi. Uji statistik dengan T-Test, berbeda bermakna jika p